?722S型分光光度計(jì)是一種可見光區(qū)分光光度計(jì),主要用于實(shí)驗(yàn)室中對(duì)液體或透明固體樣品進(jìn)行吸光度(A)或透光率(T%)測(cè)量,從而進(jìn)行定量分析、濃度測(cè)定或化學(xué)反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研究。
1. 主要用途
(1) 定量分析(最常用)
- 測(cè)定溶液中特定成分的濃度,如:
- 蛋白質(zhì)濃度(如用Bradford法、BCA法)
- 核酸濃度(DNA/RNA在260 nm處的吸光度)
- 酶活性測(cè)定(如過氧化物酶、堿性磷酸酶)
- 化學(xué)物質(zhì)含量(如葡萄糖、重金屬離子、亞硝酸鹽等)
(2) 定性分析
- 通過掃描樣品的吸收光譜(不同波長(zhǎng)下的吸光度),輔助判斷物質(zhì)的種類或純度(如色素、染料、某些金屬配合物)。
(3) 化學(xué)反應(yīng)監(jiān)測(cè)
- 實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)化學(xué)反應(yīng)的吸光度變化,研究反應(yīng)速率(如酶促反應(yīng)、氧化還原反應(yīng))。
2. 工作原理
1. 光源(鎢燈)發(fā)出白光,經(jīng)單色器(光柵)分離出特定波長(zhǎng)的光(如540 nm)。
2. 光通過樣品溶液,部分被吸收,剩余光被光電檢測(cè)器接收并轉(zhuǎn)換為電信號(hào)。
3. 儀器計(jì)算吸光度(A)或透光率(T%),并與標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)比,得出樣品濃度。
3. 722S型的特點(diǎn)
- 波長(zhǎng)范圍:通常 340~1000 nm(覆蓋可見光區(qū),部分型號(hào)可擴(kuò)展至近紅外)。
- 數(shù)字顯示:直接讀取吸光度(A)或透光率(T%),比老式指針式(如721型)更精準(zhǔn)。
- 光柵分光:比棱鏡分光的波長(zhǎng)精度更高。
- 操作簡(jiǎn)單:適合常規(guī)實(shí)驗(yàn)室,但不能測(cè)紫外光區(qū)(如需紫外檢測(cè),需用752型等紫外-可見分光光度計(jì))。
4. 典型應(yīng)用案例
應(yīng)用領(lǐng)域 | 檢測(cè)項(xiàng)目 | 常用波長(zhǎng)(nm) |
生物化學(xué) | 蛋白質(zhì)(Bradford法) | 595 |
分子生物學(xué) | DNA/RNA濃度 | 260 |
環(huán)境檢測(cè) | 水中亞硝酸鹽 | 540 |
食品分析 | 糖含量(蒽酮法) | 620 |
工業(yè)質(zhì)檢 | 染料濃度 | 根據(jù)染料最大吸收峰 |
5. 使用注意事項(xiàng)
? 調(diào)零(空白校正):用空白溶液(如蒸餾水)調(diào)100%透光率(或0吸光度)。
? 比色皿選擇:
- 玻璃比色皿:適用于可見光區(qū)(340~1000 nm)。
- 石英比色皿:如需紫外檢測(cè)(<340 nm),但722S一般不支持。
? 樣品濃度適中:吸光度最好在 0.2~0.8 之間(超出范圍需稀釋)。
? 避免氣泡或污漬:比色皿外壁需干凈,否則影響光路。
5. 722S vs. 其他型號(hào)
型號(hào) | 波長(zhǎng)范圍 | 分光方式 | 適用場(chǎng)景 |
721型 | 360~800 nm | 棱鏡分光 | 老式指針式,精度較低 |
340~1000 nm | 光柵分光 | 數(shù)字顯示,常規(guī)實(shí)驗(yàn)室 | |
752型 | 200~1000 nm | 光柵分光 | 紫外-可見光,功能更強(qiáng) |
總結(jié)
722S型分光光度計(jì)主要用于可見光區(qū)的吸光度測(cè)量,適用于生化實(shí)驗(yàn)、環(huán)境監(jiān)測(cè)、食品分析等領(lǐng)域的濃度測(cè)定。它的優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)單、價(jià)格較低,但不能測(cè)紫外光區(qū)。如需更高級(jí)功能(如紫外檢測(cè)、自動(dòng)掃描),需選擇752型等紫外-可見分光光度計(jì)。
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