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倒置顯微鏡和其他光學顯微鏡的區別

文章出處:自創 責任編輯:中特精密-LHB 發表時間:2025-06-10
  

?倒置顯微鏡(Inverted Microscope與其他常見光學顯微鏡(如正置顯微鏡、體視顯微鏡、熒光顯微鏡等)在結構、應用場景和工作原理上存在顯著差異。以下是詳細對比:

 

1. 核心區別:光路與樣品放置方式

類型

光路設計

樣品放置

物鏡位置

聚光鏡位置

倒置顯微鏡

物鏡在樣品下方,光源在上方

樣品從頂部放入(培養皿/培養瓶)

下方

上方(長工作距離)

正置顯微鏡

物鏡在樣品上方,光源在下方

樣品從頂部放入(載玻片)

上方

下方

體視顯微鏡

平行光路,雙目觀察

樣品從側面或頂部放入

側方或上方

通常無聚光鏡

 

 2. 核心功能差異

 1倒置顯微鏡的特點

- 適用樣品:  

  - 活細胞培養(培養皿、培養瓶)、厚組織切片、液態樣品(如血細胞懸液)。  

  - 無需切片:可直接觀察容器底部的細胞或顆粒。  

- 優勢:  

  - 長工作距離物鏡:避免物鏡觸碰培養器皿(如Petri dish)。  

  - 兼容培養環境:可配合恒溫CO?培養箱進行活細胞長時間觀測。  

  - 底部成像:適合觀察貼壁細胞的底部形態(如細胞遷移、粘附)。  

- 典型應用:  

  - 細胞生物學(如細胞分裂、凋亡)、微生物培養、 IVF(試管嬰兒技術)。  

 

 2正置顯微鏡的特點

- 適用樣品:  

  - 固定切片(如病理切片、植物切片)、已封片的微小樣品(如細菌涂片)。  

- 優勢:  

  - 高分辨率:物鏡NA值更高(如100×油鏡),適合觀察亞細胞結構。  

  - 成本較低:常規型號比倒置顯微鏡便宜。  

- 局限:  

  - 無法直接觀察培養皿中的活細胞(需轉移至載玻片)。  

 

 3體視顯微鏡(Stereo Microscope

- 適用樣品:  

  - 大體積或不透明樣品(如昆蟲、電路板、礦石)。  

- 優勢:  

  - 三維立體成像:低放大倍數(通常5×~100×),景深大。  

  - 操作空間大:適合顯微操作(如解剖、焊接)。  

 

2. 擴展對比(其他光學顯微鏡)

類型

核心用途

與倒置顯微鏡的區別

熒光顯微鏡

特異性標記成像(如GFP蛋白)

倒置+熒光模塊=倒置熒光顯微鏡(專用于活細胞熒光)

共聚焦顯微鏡

高分辨率三維成像

倒置設計更常見(適合厚樣品Z軸掃描)

相差顯微鏡

增強透明樣品對比度

倒置相差顯微鏡常用于無染色的活細胞觀察

 

 4. 如何選擇?

- 倒置顯微鏡:  

  - 需要觀察活細胞、培養液中的微生物或厚組織。  

  - 實驗涉及長時間動態記錄(如細胞周期追蹤)。  

- 選正置顯微鏡:  

  - 檢測固定切片、染色樣品或需要超高分辨率(如油鏡觀察細菌)。  

- 選體視顯微鏡:  

  - 操作宏觀樣品(如解剖、工業檢測)。  

 

 5. 注意事項

- 倒置顯微鏡的局限性:  

  - 物鏡NA值通常較低(受培養皿厚度限制),分辨率可能不如正置顯微鏡。  

  - 對培養器皿的底部平整度要求高(如玻璃底培養皿)。  

- 正置顯微鏡的局限性:  

  - 無法直接觀察培養容器中的樣品,需制樣,可能影響活細胞狀態。  

 

 總結

倒置顯微鏡的核心優勢在于活細胞觀察和無損檢測,而正置顯微鏡更適合高分辨率的固定樣品分析。根據實驗需求(如樣品類型、動態或靜態觀測)選擇,也可組合使用(如倒置熒光顯微鏡+共聚焦模塊)。

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